ชุดของไพรเมอร์ (primer) และตัวตรวจจับสำเร็จรูป หรือ โพรบ (probe) สังเคราะห์ ที่อยู่บนอนุภาคนาโนของโลหะทองคำ (Gold nanoparticles DNA probe) โดยใช้ยีนฟอสโฟไลเพส ซี (Phospholipase C), วิธีการตรวจสารพันธุกรรม และชุดตรวจสารพันธุกรรมสำหรับการตรวจหาเชื้อแบคทีเรียลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนสในอาหาร

Abstract

การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับชุดของไพรเมอร์ (primer) และตัวตรวจจับสำเร็จรูป หรือ โพรบ (probe) สังเคราะห์ ที่อยู่บนอนุภาคนาโนของโลหะทองคำ (Gold nanoparticles DNA probe) โดยใช้ยีน ฟอสโฟไลเพส ซี (Phospholipase C), วิธีการตรวจสารพันธุกรรม และชุดตรวจสารพันธุกรรมสำหรับ การตรวจหาเชื้อแบคทีเรียลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส CListeria monocytogenes) ในอาหาร โดยการ ออกแบบไพรเมอร์และตัวตรวจจับสำเร็จรูปที่ติดฉลากบนผิวอนุภาคทองคำ สำหรับตรวจเชื้อลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส (Listeria monocytogenes) 4 เส้น จากลำดับเบสในส่วนของยีนฟอสโฟไลเพส ซี (Phospholipase C) ที่จำเพาะต่อเชื้อลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส (Listeria monocytogenes) ซึ่งตัวตรวจจับ สำเร็จรูปจะติดฉลากด้วยไทออล (Thiol) และทำการติดฉลากบนผิวอนุภาคทองคำด้วยพันธะซัลไฟล์ ในระบบนี้ดีเอ็นเอเป้าหมายจะถูกเพิ่มปริมาณภายใต้อุณหภูมิ 60-70 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ในกล่องให้ความร้อน (heating block) หลังจากนั้นนำผลิตภัณฑ์แลมป์ (LAMP products) ไปทำ ปฏิกิริยากับตัวตรวจจับสำเร็จรูปที่ติดฉลากบนผิวอนุภาคทองคำ (Gold nanoparticles DNA probe) ที่ ออกแบบอย่างจำเพาะต่อผลิตภัณฑ์แลมป์ (LAMP products) แล้วให้ความร้อนที่อุณหภูมิ 50 องศา เซลเซียส ต่ออีก 10 นาที ต่อจากนั้นเติมสารละลายเกลือแมกนีเซียมซัลเฟต ลงไปในสารละลาย รอเวลา 5-15 นาที แล้วอ่านผลการตรวจ